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應用領域 | 醫療衛生,生物產業 |
PolyHYDROXYETHYL A
PolyLC色譜柱這種中性的、極性材料是專門為親水相互作用色譜(HILIC)開發的。HILIC是在正相色譜基礎上變化的,用極性固定相及其部分水流動相來執行。一般用來純化分離多肽,核酸、碳水化合物、某些蛋白質和極性溶劑。相比于其它材料的HILIC, PolyHYDROXYETHYL A™提供了更加尖銳的峰和更好的選擇性和復蘇性。他的大極性意味著更少的有機溶劑需要保留。PolyLC色譜柱應用于:
1)分析代謝組學的極性小分子或者分析通過HILIC-MS / MS的在等離子體或粗提取物中的特異小分子(氨基酸;甲氨喋呤)。
2)涉及到不同極性集團的小肽分離和圖譜 (Ser -、糖肽等)。
3)合成的或者天然的肽段或者片段的多維純化。
4)不溶于水介質的溶質的高效液相色譜(膜蛋白質,磷脂)
5)從樣品中去除去污劑,脂肪,鹽
6)寡核糖核酸及其類似物
當沒有有機溶劑的情況下,PolyHYDROXYETHYL A™應用于尺寸排阻色譜法(SEC)。
對于蛋白和多肽,請使用200 -或300-?材料。對于極性小分子溶質,請使用我們的3-µm,100-?的材料。
PolyCAT A
-蛋白質的陽離子交換
PolyCAT A™是通過一種*的方法把聚天冬胺酸共價偶聯在硅膠上。蛋白質從多肽表面洗脫,伴隨有小拖尾的尖銳峰。結合能力和復蘇能力也同樣很高。
PolyCAT A™適用于:
1)涉及到脫氨基、PEG化、去唾液酸化等作用的蛋白質突變體,廣泛適用于生物技術產業。
2)血紅蛋白變體的臨床化學實驗室分析。
3)PI大于6的蛋白質
4)單克隆抗體
5)組蛋白
由于是一種弱陽離子交換(WCX)材料,所以它適用于PH值大于4的條件。無緩沖的醋酸梯度將會卸載PolyCAT A™ ,允許在揮發性溶劑中洗脫蛋白質。
包含了至少兩個額外的陽離子大于PH4的肽也可以使用PolyCAT A™。更弱的基本肽,如胰多肽片段,不能確定可以被保留。我們建議您使用另一款適用于pH = 2.7 - 3.0的柱子PolySULFOETHYL A™。
大于20 KDa的蛋白質,我們建議您使用孔隙直徑大于1000-?的產品,可以為您提供/優的選擇性和效率。我們的1000 -?或1500-?孔隙的3-µm材料是可供選擇的用于蛋白質分離的陽離子交換材料。
PolyWAX LP
適用于:
1)氨基酸、多肽和蛋白質的等靜分離。
2)磷酸肽的選擇性分離和分化。
3)大多數蛋白質分子的等電點低于7,所以是使用陰離子交換色譜法純化和分析。
PolyWAX LP™是一種基于弱親水性陰離子交換(WAX)材料的基礎上開發的酶和其他蛋白質的高效液相色譜法。其選擇性是非常卓/越的,高選擇性的以及定量恢復生物活性。大多數陰離子交換的材料是在聚乙烯亞胺(PEI)的基礎上,主要是采用了傳統的支化高分子聚合物。PolyWAX LP™是采用線性的PEI,它具有更大的選擇性和復活能力。
陰離子交換法是大于15個堿基的寡核苷酸及其同型物的高分辨率的選擇方法,它比PAGE凝膠電泳從PCR反應物中純化雙鏈DNA要更快更方便。
使用 PolyWAX LP™ 用于:
1)從天然產物中純化酸性的蛋白質和多肽
2)寡核糖核酸及其類似物的分析純化以及PCR產物的放大
3)蛋白質組學,完整的蛋白質經過離子交換后的簡化分餾。
4)小的酸性溶質的陰離子交換
對于小溶質,請使用我們的100- ?材料。肽段請使用300。大于20 KDa的蛋白,我們推薦您使用孔隙直徑至少1000 ?的材料,能達到/優的選擇性和效率。我們的3-µm,1500- ?的材料為您提供*的分離密切相關的蛋白變體的能力。
PolyGLYCOPLEX
復合碳水化合物的HILIC
這種中性材料具有顯著保留復合碳水化合物的HILIC模式的高容量的需要。柱子僅僅用乙腈和水就可以頻繁地操作,盡管某些帶電的碳水化合物可能要求鹽溶液比如醋酸銨等。這些條件可以很方便的分離碳水化合物或直接流進質譜儀。為多糖及其衍生物如2-氨基吡啶熒光團提供了非常好的選擇。低聚糖混合物也通常用其解決,雖然梯度洗脫通常是用于混合樣品。Sialylated和asialo - glycans使用相同的運行條件便可以解決。對比HPAEC和PAD檢測,在某些情況下的選擇性,兩者的運行條件和設備的維護更加方便。
PolySULFOETHYL A
肽的陽離子交換
強陽離子交換材料(SCX)是專門為肽段的高效液相色譜(HPLC)而設計的。在pH值2.7-3.0的時候,多肽失去(-)離子而獲得(+)離子,因此PolySULFOETHYL A™是一種多用途的替代反相(RPC)的材料,多肽的分離是通過電荷而非極性。對比其他的基于磺丙基團的SCX材料, PolySULFOETHYL A™ 有顯著的親水性。將和肽的疏水相互作用降低到/小,具有高復蘇性以及更小的峰拖尾。生產力也很高,允許胰.酶消化的弱堿性肽段有更好的保留和分離。離子交換的能力是類似的RPC柱容量的四倍。因而,離子交換應該是多步驟純化的*步。
PolySULFOETHYL A™適用于:
混合肽段的多維高效液相色譜法,如胰.酶消化的蛋白質組學分析(包括iTRAQ®和ICAT®*反應和產品)。
1)從天然產物分離的肽段。
2)質量控制和凈化的合成肽。
3)選擇性的分離胰.酶消化的硫化物-肽、磷酸肽以及C端片段。
4)消化的肽段圖譜(胰.酶、V8、溴化氫等)
蛋白質也可以使用PolySULFOETHYL A™ 柱;在PH3的情況小,保證能全部保留下來。一個例子就是通過親水相互作用模式使用PolySULFOETHYL A™柱分離肺表面蛋白。
多肽分析的標準材質是300-?, 3 -或5-µm兩種可供選擇。200-?的材料大約有25%的更大容量,以及更加適用于磷酸肽的分離和iTRAQ®反應混合物肽段的分離。對于蛋白質,使用1000-?的材料或者3-µm的1500-?的材料。
PolyPROPYL A
蛋白和肽段的疏水相互作用色譜 (HIC) -
HIC分離蛋白的方法是基于蛋白質的疏水特點,比如RPC。但是,HIC使用*含水的緩沖器,保留住了蛋白質的三級結構和生物活性。這種分離性通常優于RPC方法分離蛋白質和多肽,能夠極/大的保留蛋白質的二級結構和三級結構。通常情況下,樣品使用硫酸鹽或磷酸鹽等鹽濃度降低梯度洗脫,通過增加蛋白質表面疏水性將其洗脫。表面活性劑(例如丙磺酸;辛基糖苷) 如果必要的話可以被添加到流動相的。PolyPROPYL A™ , PolyETHYL A™ 和PolyMETHYL A™ 的相對疏水值分別是100, 60和15。HIC比其他方法有更大的敏感性,尤其是涉及到非極性基團。HIC適用于:
1)多維蛋白純化(建議順序:離子交換-鹽梯度洗滌分離-HIC)。
2)多肽的純化(比如毒液、糖肽類)
3)表面抗體
4)質量控制分析蛋白質的單一殘基的極性或者突變體的修飾位點。
大于20KDa的蛋白質建議使用1000 -或1500-A 的孔。其能力可以與離子交換相媲美。除非該蛋白是*的顯著疏水性,建議使用PolyPROPYL A™。
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